本发明公开了T1脂肪酶突变体和应用，所述突变体是对序列SEQ ID NO：1中氨基酸取代位置至少发生如下任意一种突变：(1)采用“原始氨基酸‑位置‑替换的氨基酸”表示脂肪酶突变体中单点突变的氨基酸L359S、I362E或V364N；(2)采用氨基酸序列片段置换方式发生突变，将野生型T1的288‑291位氨基酸残基Asn‑Ala‑Phe‑Ser置换成Glu‑Phe‑Thr‑Lys。突变体水解甘油酯的活性有不同程度的提高，分别是野生型T1的6、6、4、6、3、5倍，而突变体的最适反应温度及pH并没有明显变化。本发明所得突变体，更适合生物化工行业的应用，尤其适应用于难熔油脂的改性。