本发明属于生物技术领域，尤其涉及一种利用松花粉粕制备抗氧化松花粉肽的方法。本发明将松花粉水提物制备过程中产生的大量松花粉粕残渣废物再利用，充分利用了残渣中的大量优质蛋白质资源，同时缓解了环境压力。制备的具有抗氧化活性的松花粉肽具有安全性高、氨基酸配比合理等特点，在食品领域有着广阔的市场前景。所提供的制备方法工艺简单、反应温度低，能提高松花粉蛋白的抗氧化性，在最佳工艺条件下所得到的松花粉肽超氧阴离子抑制率为18.7％，DPPH清除率达到76.8％，羟自由基抑制率达到94.6％，可为食品、医药等行业提供优质的天然抗氧化剂。