本发明公开了一种利用里氏木霉作为宿主表达重组蛋白的方法。本发明所提供的利用里氏木霉作为宿主表达重组蛋白的方法，包括如下步骤：将含有待表达的目的蛋白的编码基因的表达盒克隆到里氏木霉基因组中位于Protein ID为68606的基因和Protein ID为68608的基因之间的非编码区。本发明实验证明在cbh1基因缺失株中，将cbh1基因的表达骨架整合入位点ND1，并与野生菌株比较cbh1基因的表达水平，发现将重组基因插入该位点，可以获得与cbh1位点相当的表达水平。本发明进一步丰富完善了利用里氏木霉作为宿主高效表达重组蛋白的技术方案。