制备胞磷胆碱用重组菌、重组菌构建方法及应用

    公开(公告)号:CN118755647A

    公开(公告)日:2024-10-11

    申请号:CN202410648478.9

    申请日:2024-05-23

    摘要: 本发明涉及合成生物学技术领域,具体公开制备胞磷胆碱用重组菌及其应用,所述重组菌包括能够表达胆碱激酶和磷酸胆碱胞苷转移酶编码基因的重组菌A,在ATP和CTP共底物条件下催化氯化胆碱形成胞磷胆碱;能够表达胞苷激酶、胞苷酸激酶和核苷二磷酸激酶编码基因的重组菌B,在ATP共底物条件下催化CR形成CTP以及能够表达多磷酸AMP磷酸转移酶、多聚磷酸激酶和焦磷酸水解酶编码基因的重组菌C,直接以六偏磷酸钠为底物催化AMP/ADP形成ATP,并降解焦磷酸为磷酸促进胞磷胆碱的合成。本发明提供的重组菌应用在产胞磷胆碱中,仅需添加与氯化胆碱浓度等摩尔比的胞苷和5%摩尔比的单磷酸腺苷作为共底物,就能获得高浓度的胞磷胆碱,实现胞磷胆碱的高产量以及氯化胆碱和CR的高转化率。

    利用大肠杆菌从头合成谱劳诺托的方法及其构建的工程菌

    公开(公告)号:CN117802136A

    公开(公告)日:2024-04-02

    申请号:CN202410114684.1

    申请日:2024-01-26

    摘要: 本发明公开利用大肠杆菌从头合成谱劳诺托的方法以及构建的工程菌,通过将外源MVA途径的全部基因转化至工程化大肠杆菌MG1655细胞的基因组上提高IPP和DMAPP的通量,然后将DPP1基因连接到整合有MVA途径全部基因的pTrc99a质粒上,使得香叶基香叶醇产量得到提升;而后进一步将CYP97C27基因和CPRⅠ基因连接到pTrc99a质粒上,使细胞色素P450单加氧酶CYP97C27和细胞色素P450还原酶CPRⅠ两种细胞色素酶催化香叶基香叶醇的C18位置进行羟基化,最后获得的工程菌可以利用葡萄糖为底物合成谱劳诺托。

    利用金色链霉菌生产金霉素的方法

    公开(公告)号:CN113388556B

    公开(公告)日:2022-12-02

    申请号:CN202110901176.4

    申请日:2021-08-02

    IPC分类号: C12N1/20 C12P29/00 C12R1/49

    摘要: 本发明公开了一种利用金色链霉菌生产金霉素的方法。本发明通过组合优化培养基和培养方法,促进了金霉素的合成与积累,进一步减少杂质四环素和去甲基金霉素的比例。本发明基于多重复合诱变和前体/产物耐受构建了高产菌株选育模型,不仅突变库的多样性更高,而且简便快捷,提高了筛选效率并减少了筛选工作量,对金霉素及其他链霉菌来源抗生素的生产成本降低和产能提高都具有一定的应用价值和指导意义。本发明的突变株能高效合成和积累金霉素、杂质四环素和去甲基金霉素含量显著降低,遗传稳定性良好,连续传代五代其形态、颜色、产金霉素水平以及主要杂质的含量基本稳定,能够应用于工业化发酵生产及作为进一步研究开发的生产菌株。