本发明提供一种石蒜属植物原生质体的提取方法，该方法包括如下步骤：(1)石蒜属植物幼苗黑暗处理10‑12h，分别取幼嫩叶片或鳞茎切碎；(2)用试剂A处理步骤(1)中得到的碎片材料，在摇床上缓慢震荡处理，释放原生质体；(3)将步骤(2)获得的原生质体溶液用40‑50μm滤网进行过滤，滤液离心8‑10min，用试剂B清洗沉淀物，反复离心，最后用试剂C悬浮原生质体。本发明的石蒜属植物原生质体的提取方法，获得的原生质体数量多、完整性好，可直接用于石蒜生物碱类物质加兰他敏的检测，并为原生质体融合和原生质体转化提供重要材料。