本发明公开了一种人血白蛋白分子大小分布超高效液相色谱测定方法，所述方法包括用超高效液相色谱测定人血白蛋白分子大小分布的步骤，在超高效液相色谱分析中采用ACQUITY UPLC PROTEIN BEH SEC Column、粒度1.7μm、柱长150mm、柱直径的色谱柱，柱温为室温，采用流动相为0.2mol·L‑1、流速0.6ml·min‑1的PBS缓冲液，使用Waters UPLC TUV紫外检测器280nm采集数据，样品进样体积10μl，强洗针液体积200μl，弱洗针液体积600μl，定量环可选项partial loop with needle overfill。本研究建立的UPLC人血白蛋白分子大小分布测定方法相比于原HPLC方法检测速度提高了10倍以上，色谱响应提高了5倍以上；UPLC法测定人血白蛋白产品的多聚体含量快速简便、重复性好；UPLC方法有助于实现高通量的人血白蛋白多聚体测定，大幅提高人血白蛋白检验效率。