本发明提供生鲜牛奶中残留双氯芬酸钠的检测方法，将待测生鲜牛奶样品和系列浓度标准溶液分别进行提取，提取以乙腈和乙酸铵为提取试剂，将提取所得溶液净化后，使用流动相进行洗脱，进行液相色谱-串联质谱检测，根据待测生鲜牛奶样品和系列浓度标准溶液的测定结果，定性或定量测定待测生鲜牛奶中的残留双氯芬酸钠；待测生鲜牛奶样品是在待测生鲜牛奶中加入同位素内标得到的；系列浓度标准溶液是在空白生鲜牛奶中加入双氯芬酸钠系列标准工作溶液和同位素内标得到的。本发明的内标为双氯芬酸钠(乙酰苯环13C)同位素标记物，采用串联三重四极杆质谱作为检测器，满足定性、定量检测生鲜牛奶中双氯芬酸钠残留量的要求，方法简单，结果准确可靠。