本发明公开了一种利用甲基磺酸乙酯离体诱变梁山慈竹的育种方法。本发明提供了一种获得梁山慈竹的突变体植株的方法，包括如下步骤：利用甲基磺酸乙酯对来源于梁山慈竹的愈伤组织进行诱变。所述获得梁山慈竹的突变体植株的方法还包括如下步骤：将诱变后的愈伤组织培养为再生植株。所述获得梁山慈竹的突变体植株的方法还包括如下步骤：从再生植株中筛选突变体植株。本发明所提供方法中将诱变技术与离体培养相结合，利用甲基磺酸乙酯离体诱变梁山慈竹的愈伤组织，可以获得数量大而且同质的诱变群体。本发明极大程度提高了突变频率和育种效率，有利于提高梁山慈竹诱变育种，将推动梁山慈竹的产业化发展，具有重大的应用推广价值。