一种用于制备手性苯基乙二醇的环氧化物水解酶的制备方法，它是以来自微生物Agromyces mediolanus的环氧化物水解酶氨基酸序列为模板，在NCBI等数据库中进行基于挖掘，将获得的基因克隆到大肠杆菌、酵母或枯草芽孢杆菌中进行表达；然后以苯基环氧乙烷为反应底物，利用重组大肠杆菌静息细胞进行催化，检测产物苯基乙二醇的对映体过量值，从而筛选获得新型环氧化物水解酶，用于制备手性纯的苯基乙二醇；具体是：将SEQ ID NO.1所示的环氧化物水解酶表达至大肠杆菌、酵母或枯草芽孢杆菌中，培养菌体细胞，以200～280U/g苯基环氧乙烷反应底物的添加量加入所述细胞，并在pH为6～8的有机相中进行催化，获得手性纯的苯基乙二醇。