本发明公开了一种球孢白僵菌及其在烟草黑胫病防治中的应用，属于植物保护技术领域；所述的球孢白僵菌的编号HFBb009，2017年9月8日保存于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为14158；本发明首次使用球孢白僵菌应用到烟草黑胫病的防治中；数据表明，球孢白僵菌(编号为HFBb009)对烟草黑胫病抑制率好，随着时间的延长，球孢白僵菌对病原真菌烟草黑胫病菌逐渐增强，且浓度为1.0×106的球孢白僵菌孢子悬浮液对烟草黑胫病抑制作用最明显。