一种用于黄条鰤呼吸生理指标测定的装置及其使用方法，属于鱼类代谢能量测定的实验技术领域，所述装置包括水箱和呼吸室；呼吸室固定在水箱内，上部玻璃水箱盖板；水箱的左侧下端设有水箱进水管，所述水箱的右侧上端设有水箱出水管；所述水箱的内部设有呼吸室，呼吸室的左侧下部设有呼吸室进水管，呼吸室进水管与外部进水容器连接，所述呼吸室的外部上面设有温度计；所述呼吸室的右端设有呼吸室盖，上部设有呼吸室出水管，所述呼吸室出水管与外部的盛水容器通过软管连接。本发明装置可以同时进行多组实验，且便于调整某个出现问题的呼吸室，很大程度上减小了实验误差，提高了实验的准确性。