本发明公开了一种丝素固定芋头多酚氧化酶的方法，该方法包括如下步骤：以丝素为载体对芋头多酚氧化酶进行固定化，考察固定化温度、固定化时间、pH值及PPO粗酶液与固定化酶的固液比为吸附条件，依据考马斯亮蓝法，通过紫外‑可见分光光度法检测，利用标准曲线和计算公式，确定固定化过程中多酚氧化酶的负载量、固定化酶活力、活力回收率及酶吸附含量。本发明成本较低，操作简单，原料广泛易得，而且制得的固定化酶具有酶的稳定性，并保持芋头多酚氧化酶的高效、专一性，并且具有分离回收便捷、重复使用，连续操作可控性好等特点。