本发明公开了一种具有高let‑7b成熟体表达量的单倍型鸡成肌细胞的构建方法，其包括：1)单倍型表达载体克隆；2)鸡原代成肌细胞培养；3)细胞转染。采用3000Reagents方法分别对鸡原代成肌细胞转染5种单倍型重组质粒，获得5种具有高let‑7b成熟体表达量的单倍型成肌细胞。本发明构建出不同单倍型过表达载体，并转染至鸡原代成肌细胞以测定不同单倍型对let‑7b成熟体表达量的影响，从而获得具有高let‑7b成熟体表达量的单倍型鸡成肌细胞，推断出其表达量差异的原因是因为let‑7b前体区上不同的SNP影响let‑7b前体加工过程，从而导致let‑7b成熟体表达量差异。