一种用于预防伤口感染的抗菌凝胶的制备方法，属于药物制剂技术领域。本发明取结冷胶和乳酸链球菌素粉末分别溶于去离子水，随后将两者进行等体积混合，再加入EDTA粉末，反应后冻干得到冻干粉末，最后用去离子水配置成水凝胶，即为成品抗菌凝胶。本发明制备的抗菌凝胶采用的结冷胶具有良好的成胶性能，在接枝了部分乳酸链球菌素后，形成的凝胶便具有了乳酸链球菌素的抗菌作用，加入了EDTA后使得该凝胶对一些革兰氏阴性菌也是有效的，而且水凝胶的多孔结构对乳酸链球菌素有一个保护作用，可以适当隔绝乳酸链球菌素与外界的接触，在一定程度上延长乳酸链球菌素的抗菌时效。