本发明提供了一种2‑酮基‑L‑古龙酸的发酵用培养基，其含有0.007～0.009g/L的混合营养剂，所述混合营养剂重量百分比组成为：25～67％的细胞色素C和33～75％的血红素。本发明还提供一种2‑酮基‑L‑古龙酸的发酵生产方法，通过在发酵培养基中的混合营养剂浓度降至0.001～0.003g/L时补充加入所述混合营养剂，以维持其浓度在0.001～0.003g/L直至发酵结束，或者当在线溶氧值为20％～40％时补充加入吡咯喹啉醌使其在培养基中的浓度为0.003～0.005g/L，均可以缩短发酵周期、提高2‑酮基‑L‑古龙酸的合成效率。