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公开(公告)号：CN115960856B
公开(公告)日：2024-09-24
申请号：CN202310072432.2
申请日：2023-01-17
申请人： 黑龙江新和成生物科技有限公司 , 浙江新和成股份有限公司
摘要： 本发明公开了一种糖基转移酶融合酶变体及其在AA‑2G制备中的应用，属于酶工程技术领域。本发明通过将CGTase‑Tx的前1‑331段氨基酸和CGTase‑Bs的后327‑681段氨基酸融合，得到CGTase‑TB融合酶，提高了酶的催化效率。本发明还通过对CGTase‑TB融合酶进行突变，使突变体的催化活性较融合酶进一步提升，比活力达9.21～19.53U/mg，AA‑2G收率提升至70％以上，且突变体的热稳定性相对亲本明显提高，在70℃处理4小时，酶的活性仍有90％残留。
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公开(公告)号：CN118562902A
公开(公告)日：2024-08-30
申请号：CN202410767973.1
申请日：2024-06-14
申请人： 黑龙江新和成生物科技有限公司 , 浙江新和成股份有限公司
IPC分类号： C12P7/6434 , C12N1/14 , C12R1/645
摘要： 本发明公开了一种裂殖壶菌发酵法生产DHA的供氧控制方法，属于微生物发酵生产脂质领域。本发明通过用实时OUR数据替代溶氧数据进行发酵过程控制，调控工艺简单易行，受环境因素影响小，可以在不影响菌种代谢的情况下将发酵环境的溶氧降低，有利于产物的积累，减少损失，提高DHA产量。
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公开(公告)号：CN116024278B
公开(公告)日：2024-05-07
申请号：CN202211623380.5
申请日：2022-12-16
申请人： 黑龙江新和成生物科技有限公司 , 浙江新和成股份有限公司
摘要： 本发明公开了一种发酵法制备D‑泛酸的方法，是通过在利用D‑泛酸生产菌株发酵生产D‑泛酸的过程中，向发酵体系中额外添加甲基供体的同时添加甲基供体的载体，大大提高了D‑泛酸的合成产量。通过本发明提供的制备方法得到的D‑泛酸产量高、杂质含量低，同时该制备方法简单，添加的甲基供体和甲基供体的载体容易得到，成本较低。
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公开(公告)号：CN116217428B
公开(公告)日：2024-04-02
申请号：CN202211654801.0
申请日：2022-12-22
申请人： 黑龙江新和成生物科技有限公司 , 浙江新和成股份有限公司
IPC分类号： C07C231/12 , C07C231/24 , C07C235/12 , C07C29/00 , C07C29/78 , C07C31/04 , C12P13/04 , C12R1/19
摘要： 本申请涉及一种D‑泛酸钙的甲醇水合物晶体及D‑泛酸钙的制备方法，D‑泛酸钙的甲醇水合物晶体的制备方法包括以下步骤：于40℃～45℃下，将D‑泛酸钙溶液和甲醇混合溶解，得到D‑泛酸钙的混合液；将所述D‑泛酸钙的混合液进行第一次降温，以使所述D‑泛酸钙的混合液的温度在0.5h内降至25℃～15℃，加入晶种后进行第一次保温处理，然后进行第二次降温处理，以使所述D‑泛酸钙的混合液的温度在≥4h内降至5℃～0℃，再进行第二次保温处理，得到D‑泛酸钙的甲醇水合物晶体。
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公开(公告)号：CN117447349A
公开(公告)日：2024-01-26
申请号：CN202311268995.5
申请日：2023-09-28
申请人： 黑龙江新和成生物科技有限公司 , 浙江新和成股份有限公司
IPC分类号： C07C231/24 , C07C235/12
摘要： 本发明公开了一种去除发酵维生素B5中有机酸的方法，包括：(1)D‑泛酸铵发酵液通过陶瓷膜、超滤膜、阳离子树脂处理后得到D‑泛酸溶液；(2)D‑泛酸溶液经过阴离子树脂柱进行处理，得到去除有机酸的阴柱液；所述的阴离子树脂柱中填充的树脂为丙烯酸骨架弱碱阴离子交换树脂。该方法能够有效除去生物发酵法在合成维生素B5的过程中产生的有机酸，可以提高最终产品的收率和纯度，并且更有利于维生素B5的结晶。
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公开(公告)号：CN116217428A
公开(公告)日：2023-06-06
申请号：CN202211654801.0
申请日：2022-12-22
申请人： 黑龙江新和成生物科技有限公司 , 浙江新和成股份有限公司
IPC分类号： C07C231/12 , C07C231/24 , C07C235/12 , C07C29/00 , C07C29/78 , C07C31/04 , C12P13/02 , C12R1/19
摘要： 本申请涉及一种D‑泛酸钙的甲醇水合物晶体及D‑泛酸钙的制备方法，D‑泛酸钙的甲醇水合物晶体的制备方法包括以下步骤：于40℃～45℃下，将D‑泛酸钙溶液和甲醇混合溶解，得到D‑泛酸钙的混合液；将所述D‑泛酸钙的混合液进行第一次降温，以使所述D‑泛酸钙的混合液的温度在0.5h内降至25℃～15℃，加入晶种后进行第一次保温处理，然后进行第二次降温处理，以使所述D‑泛酸钙的混合液的温度在≥4h内降至5℃～0℃，再进行第二次保温处理，得到D‑泛酸钙的甲醇水合物晶体。
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公开(公告)号：CN115976157A
公开(公告)日：2023-04-18
申请号：CN202211723747.0
申请日：2022-12-30
申请人： 黑龙江新和成生物科技有限公司 , 上虞新和成生物化工有限公司 , 浙江新和成股份有限公司
摘要： 本发明涉及一种催化合成L‑抗坏血酸‑2‑葡萄糖苷的环糊精转移酶的高通量筛选方法，包括如下步骤：在待筛选菌株的培养体系中加入β‑环糊精和抗坏血酸，调节pH至5.0‑6.0进行催化反应；催化反应之后去除菌株，加入氧化剂进行氧化反应；氧化反应之后加入L‑抗坏血酸‑2‑葡萄糖苷的显色剂进行显色。本发明通过预氧化的策略，使未反应的抗坏血酸得以去除，再加入能与L‑抗坏血酸‑2‑葡萄糖苷显色的物质，在一定条件下进行反应，并且反应后可以方便地在酶标仪进行检测，从而准确定量反应液体系中L‑抗坏血酸‑2‑葡萄糖苷的含量，为高通量筛选突变菌株带来便利。
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公开(公告)号：CN115925573A
公开(公告)日：2023-04-07
申请号：CN202211418584.5
申请日：2022-11-14
申请人： 浙江新和成股份有限公司 , 黑龙江新和成生物科技有限公司
IPC分类号： C07C231/24 , C07C235/12
摘要： 本发明涉及一种D‑泛酸钙的纯化方法。其以D‑泛酸钙粗品的水溶液作为原料，以大孔吸附树脂为固定相，以水为流动相，采用顺序式模拟移动床进行分离，所述大孔吸附树脂为不含官能团的苯乙烯‑二乙烯基苯共聚物，其粒径为250～400μm且均一系数为1.2以下，均一系数为D90与D40的比值，所述D‑泛酸钙粗品的水溶液的质量浓度为380～420g/Kg。采用本发明的纯化方法，可以有效地将D‑泛酸钙与C8同系物和C10同系物杂质分离开来，纯化后D‑泛酸钙的纯度为99％以上，且分离方法自动化程度高，适合工业化生产。
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公开(公告)号：CN115747268A
公开(公告)日：2023-03-07
申请号：CN202211499277.4
申请日：2022-11-28
申请人： 黑龙江新和成生物科技有限公司 , 浙江新和成股份有限公司
摘要： 本申请涉及一种D‑泛酸的发酵方法，该D‑泛酸的发酵方法包括以下步骤：采用发酵培养基培养重组大肠杆菌，重组大肠杆菌为表达D‑泛酸的大肠杆菌，培养的条件包括：在发酵培养基的溶氧值大于预设值时，向发酵培养基中添加补料直至发酵培养基的溶氧值不超过所述预设值，预设值的取值范围为1％～10％，补料包含质量百分含量为30％～80％的葡萄糖和质量百分含量为0.1％～10％的氮源。上述发酵方法能够使得重组大肠杆菌更好地利用发酵培养基产生更多的D‑泛酸，且产生的乙酸不影响产物合成。
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公开(公告)号：CN113502308B
公开(公告)日：2023-02-03
申请号：CN202110406500.5
申请日：2021-04-15
申请人： 黑龙江新和成生物科技有限公司 , 上虞新和成生物化工有限公司
摘要： 本发明公开了一种基于氧化还原电位调控好氧发酵生产维生素B12的方法，该方法以好氧的维生素B12生产菌为发酵菌种进行好氧发酵；好氧发酵开始后，控制发酵液的ORP值处于50mv～75mv之间，直至发酵液中溶氧降低至30～50％，再控制发酵液的ORP值处于‑120mv～‑140mv之间，至发酵过程结束。本发明在发酵体系中引入氧化还原电位(ORP)电极的检测，利用pH值、供氧策略(搅拌转速和通气比)以及对发酵无抑制作用的氧化剂与还原剂对维生素B12的发酵过程进行多阶段ORP调控，以促进菌体生长和维生素B12合成的启动和积累，不仅提高了维生素B12的产量，还降低了原料葡萄糖和甜菜碱的消耗。
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