一种洋刀豆中脲酶的结晶提取方法
摘要:
本发明公开了一种洋刀豆中脲酶的结晶提取方法,包括如下步骤:(1)提取:洋刀豆研磨成粉,筛分后加入提取液,充分搅拌,使洋刀豆粉末中脲酶全部浸提,将浸提液在室温下离心,收集上清液;(2)粗沉淀:将上清液静置冷藏,离心,收集沉淀,得到脲酶粗沉淀;(3)冷却结晶:将脲酶粗沉淀溶于柠檬酸钠缓冲液中,搅拌至完全溶解,离心,收集上清液,得到蛋白质溶液;向蛋白质溶液中缓慢加入沉淀剂溶液,混合均匀后开始结晶,得到结晶溶液,将结晶溶液离心分离,收集脲酶晶体沉淀,冷冻干燥,得到纯度超过96%的脲酶产品。本发明操作简单,工艺过程时间短,能耗低,制备过程均采用常规固液分离手段,脲酶总活性回收率达到60%以上。
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