一种酶法降解2,6-二羟基苯甲酸的方法
摘要:
本发明公开了一种酶法降解2,6-二羟基苯甲酸的方法,包括以下步骤:步骤一:Sdc蛋白表达:步骤二:Sdc的纯化:步骤三:Sdc浓度测定:步骤四:Sdc活力测定。本发明采用已成功构建的带有His标签的Sdc大肠杆菌表达菌株,采用此表达菌株,对Sdc进行诱导表达,收集菌体,经超声破碎、离心后,获得了突变酶的粗酶液,使用His-TRap亲和层析柱对带有His6标签的Sdc进行纯化,使用纯化后的Sdc分别在不同的温度和pH条件下与2,6-二羟基苯甲酸进行反应,采用HPLC检测对产物或反应物进行检测,计算相应酶活,确定反应的最适条件,为Sdc的开发利用提供一定的理论支持。
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