发明公开
- 专利标题: 一种酶法降解2,6-二羟基苯甲酸的方法
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申请号: CN201910540277.6申请日: 2019-06-21
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公开(公告)号: CN110241102A公开(公告)日: 2019-09-17
- 发明人: 胡彦营 , 张爱民 , 李薇 , 韩小龙 , 杨永涛
- 申请人: 济宁学院
- 申请人地址: 山东省济宁市高新区海川路16号济宁高新区大学园济宁学院
- 专利权人: 济宁学院
- 当前专利权人: 济宁学院
- 当前专利权人地址: 山东省济宁市高新区海川路16号济宁高新区大学园济宁学院
- 代理机构: 北京志霖恒远知识产权代理事务所
- 代理商 王雨桐
- 主分类号: C12N9/88
- IPC分类号: C12N9/88 ; C12N15/60 ; C12N15/70 ; C12Q1/527
摘要:
本发明公开了一种酶法降解2,6-二羟基苯甲酸的方法,包括以下步骤:步骤一:Sdc蛋白表达:步骤二:Sdc的纯化:步骤三:Sdc浓度测定:步骤四:Sdc活力测定。本发明采用已成功构建的带有His标签的Sdc大肠杆菌表达菌株,采用此表达菌株,对Sdc进行诱导表达,收集菌体,经超声破碎、离心后,获得了突变酶的粗酶液,使用His-TRap亲和层析柱对带有His6标签的Sdc进行纯化,使用纯化后的Sdc分别在不同的温度和pH条件下与2,6-二羟基苯甲酸进行反应,采用HPLC检测对产物或反应物进行检测,计算相应酶活,确定反应的最适条件,为Sdc的开发利用提供一定的理论支持。