一种多酶级联转化L-酪氨酸生产酪醇和红景天苷的方法

    公开(公告)号:CN118599746A

    公开(公告)日:2024-09-06

    申请号:CN202410693207.5

    申请日:2024-05-31

    申请人: 江南大学

    摘要: 本发明涉及一种多酶级联转化L‑酪氨酸生产酪醇和红景天苷的方法,属于生物工程技术领域。本发明首先将野生糖基转移酶的第158位苏氨酸突变为丙氨酸,并将第311位酪氨酸突变为丙氨酸,得到氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示的糖基转移酶。然后构建了以大肠杆菌为宿主的共表达工程菌,通过双质粒表达系统表达糖基转移酶、酪氨酸脱羧酶和酪胺氧化酶,实现了以L‑酪氨酸为底物进行酪醇和红景天苷的高效生产。本发明的生产方法通过模块化组装和基因重复表达实现各酶的平衡表达,避免副产物的积累,实现了以L‑酪氨酸为底物高效合成酪醇和红景天苷,为酪醇和红景天苷的工业化生产奠定了基础。

    一种褐藻酸结合模块B1及其编码基因与应用

    公开(公告)号:CN118562769A

    公开(公告)日:2024-08-30

    申请号:CN202410747301.4

    申请日:2024-06-11

    申请人: 山东大学

    摘要: 本发明涉及一种褐藻酸结合模块B1及其编码基因与应用。所述褐藻酸结合模块B1的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明公开了一种新型褐藻酸结合模块B1,属于Big_7类,容易异源表达,能够特异性结合具有复杂空间结构的天然褐藻酸,为融合酶提供了新的材料,可以将褐藻酸结合模块B1与褐藻酸裂解酶融合,以增强其底物结合能力,提高催化效率,获得性能更优越的裂解酶。此外,褐藻酸结合模块B1还可以作为生物探针应用在研究褐藻细胞壁结构以及褐藻合成褐藻酸的过程中。同时,本发明提供了褐藻酸结合模块B1的晶体结构,为其理性设计提供了结构基础。

    一种重组表达载体、基因工程菌及菌的培养方法和应用

    公开(公告)号:CN113943746B

    公开(公告)日:2024-08-27

    申请号:CN202111269631.X

    申请日:2021-10-29

    摘要: 本发明涉及一种腈水合酶基因表达的基因工程菌,具体涉及一种重组表达载体、基因工程菌及菌的培养方法和应用,重组表达载体含有一段腈水合酶基因,该腈水合酶基因序列如SEQ ID NO.1所示;基因工程菌为携带该重组表达载体的宿主微生物;培养方法为将宿主微生物在LB培养基中培养得到种子液,之后将种子液接种到发酵培养基中进行培养,得到基因工程菌。与现有技术相比,本发明的腈水合酶基因能够在工程菌中实现高效表达并且其酶活性极好,经测定比酶活可达50U/mg以上,在优选条件下可以达到100U/mg,因而催化合成烟酰胺效率高,转化率可达99%以上,生产效率达到720g/(L·h)。

    一种用于烯醇化酶纯化的柱状胶和一种烯醇化酶的纯化方法

    公开(公告)号:CN118497183A

    公开(公告)日:2024-08-16

    申请号:CN202410580967.5

    申请日:2024-05-11

    发明人: 邰晶晶 胡煌

    IPC分类号: C12N9/88 C08F120/56

    摘要: 本发明提供了一种用于烯醇化酶纯化的柱状胶和一种烯醇化酶的纯化方法,属于分离纯化技术领域。本发明的用于烯醇化酶纯化的组合物,包括堆积胶和分离胶,所述堆积胶的浓度为5%;所述分离胶的浓度为12%。本发明根据目标蛋白烯醇化酶的分子量合理设置了堆积胶和分离胶的体积浓度,利于烯醇化酶的截留,能够提高烯醇化酶的被截留的效率,避免其与其他蛋白一同流出柱状胶,影响分离效率。本发明还提供了一种烯醇化酶的纯化方法,本发明的纯化方法基于所述组合物实现,该纯化方法的烯醇化酶纯化得率高。

    一种pH响应型药酶联用的纳米平台及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN118497182A

    公开(公告)日:2024-08-16

    申请号:CN202410562781.7

    申请日:2024-05-08

    申请人: 山东大学

    摘要: 本发明属于生物医药技术领域,涉及一种pH响应型药酶联用的纳米平台及其制备方法与应用。由上述褐藻胶裂解酶G258Q和左氧氟沙星共同封装于金属有机框架纳米粒ZIF‑8形成。制备方法,包括如下步骤:将左氧氟沙星与锌盐加入水中混合均匀获得溶液A;将含有所述褐藻胶裂解酶G258Q的酶液与二甲基咪唑溶液混合均匀获得溶液B;将溶液A与溶液B进行混合,使锌离子与二甲基咪唑反应生成ZIF‑8。本发明提供的纳米平台不仅在体外具有良好的杀菌作用,而且在体内也同样具有良好的抗感染效果。