本发明公开了一种菌袋培养球孢白僵菌孢子粉的方法。首先在液体培养阶段，配制碳源、氮源等营养成分，供白僵菌生长至芽孢子浓度达108～109个/mL转接固体培养基。固体培养阶段，采用米为培养基，接种液体菌后，将食用菌栽培袋与出菇圈、无菌透气封口膜用橡皮筋组合，形成一个圆柱状的微型“发酵罐”。通过菌袋培养隔绝环境微生物污染，又能良好通气，且利用菌袋内壁吸附白僵菌代谢的水分，促进白僵菌快速产孢。该方法产孢周期为8天～10天，无需大型发酵罐设备，操作简便，原料、设备、人工、时间成本低，适合农业合作社作坊式生产。制得的孢子粉可用于中药材僵蚕生产接种，也可作为原料加工成微生物杀虫剂用于农业害虫的生物防治。