本发明提供牛支原体强毒株及其应用，属于微生物技术领域。本发明牛支原体强毒株，分类命名为牛支原体(Mycoplasma bovis)16M株，中国典型培养物保藏中心(China Center for Type Culture Collection，CCTCC)保藏号为M2019235。该毒株能够诱导包括气喘、明显肺部实变等多种牛支原体感染典型临床病症，对牛的肺部具有很强的侵袭力，其活菌滴度高，毒力强，致病性高，病牛排菌时间长，发病快，攻毒后肺部毒株再次分离率高，可用于建立具有典型病症的牛支原体发病模型，符合牛场临床发病特征，因此本发明牛支原体强毒株具有良好的实际应用之价值。