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公开(公告)号：CN108179172B
公开(公告)日：2020-05-22
申请号：CN201711447992.2
申请日：2017-12-27
申请人： 山东省农业科学院奶牛研究中心
摘要： 本发明涉及体外诊断试剂及制备方法，具体涉及一种牛支原体药敏快速检测试剂盒及其制备方法。本发明提供了一种牛支原体药敏快速检测试剂盒，所述试剂盒包括牛支原体培养液、药敏板和抗生素药物。所述牛支原体培养液包括以下成分及含量：PPLO粉10～15g，短肽2～4g，莫诺苷100～500mg，酵母粉2～6g，葡萄糖1～3g，丙酮酸钠1.5～4.5g，MEM培养基80～120mL，1％(w/v)酚红溶液2mL，马血清100～300mL，30万单位青霉素和ddH2O 700～800mL。本发明培养液能快速促进牛支原体生长，20‑24h内即可完成检测，且性能稳定，特异性强。
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公开(公告)号：CN108179172A
公开(公告)日：2018-06-19
申请号：CN201711447992.2
申请日：2017-12-27
申请人： 山东省农业科学院奶牛研究中心
摘要： 本发明涉及体外诊断试剂及制备方法，具体涉及一种牛支原体药敏快速检测试剂盒及其制备方法。本发明提供了一种牛支原体药敏快速检测试剂盒，所述试剂盒包括牛支原体培养液、药敏板和抗生素药物。所述牛支原体培养液包括以下成分及含量：PPLO粉10～15g，短肽2～4g，莫诺苷100～500mg，酵母粉2～6g，葡萄糖1～3g，丙酮酸钠1.5～4.5g，MEM培养基80～120mL，1％(w/v)酚红溶液2mL，马血清100～300mL，30万单位青霉素和ddH2O 700～800mL。本发明培养液能快速促进牛支原体生长，20-24h内即可完成检测，且性能稳定，特异性强。
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公开(公告)号：CN111549157A
公开(公告)日：2020-08-18
申请号：CN202010424356.3
申请日：2020-05-19
申请人： 山东省农业科学院奶牛研究中心
摘要： 本发明具体涉及一种牛支原体的SYBR Green I荧光定量PCR检测方法。牛支原体是一种严重威胁牛养殖业的病原体，目前尚没有有效的治疗药物及疫苗，提供高效精确的检测方法对于牛支原体的防治具有重要意义。本发明研究表明P59蛋白编码基因序列在牛支原体种内高度保守且与其他物种相似度低，是一种良好的检测标志物。具体的，本发明还提供一种基于P59蛋白的SYBR Green I荧光定量PCR的检测方法，经验证，具有良好的检测特异性及灵敏度。该方法的建立为牛支原体病的快速、准确、高精度检测提供了新的诊断方法，为牛支原体的防控提供了一定保障。
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公开(公告)号：CN111549157B
公开(公告)日：2022-05-17
申请号：CN202010424356.3
申请日：2020-05-19
申请人： 山东省农业科学院奶牛研究中心
摘要： 本发明具体涉及一种牛支原体的SYBR Green I荧光定量PCR检测方法。牛支原体是一种严重威胁牛养殖业的病原体，目前尚没有有效的治疗药物及疫苗，提供高效精确的检测方法对于牛支原体的防治具有重要意义。本发明研究表明P59蛋白编码基因序列在牛支原体种内高度保守且与其他物种相似度低，是一种良好的检测标志物。具体的，本发明还提供一种基于P59蛋白的SYBR Green I荧光定量PCR的检测方法，经验证，具有良好的检测特异性及灵敏度。该方法的建立为牛支原体病的快速、准确、高精度检测提供了新的诊断方法，为牛支原体的防控提供了一定保障。
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公开(公告)号：CN110338138A
公开(公告)日：2019-10-18
申请号：CN201910532808.7
申请日：2019-06-19
申请人： 山东省农业科学院奶牛研究中心
摘要： 本发明提供一种牛支原体感染豚鼠的动物模型构建方法及其应用，属于动物模型构建技术领域。本发明制备得到的牛支原体感染豚鼠动物模型，其对牛支原体敏感期长达42天，同时有效模拟牛支原体感染犊牛肺炎症状，因而可用于牛支原体疫苗保护效果尤其是长期保护效果的评价，具有良好的实际应用之价值。
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公开(公告)号：CN110338138B
公开(公告)日：2021-04-06
申请号：CN201910532808.7
申请日：2019-06-19
申请人： 山东省农业科学院奶牛研究中心
摘要： 本发明提供一种牛支原体感染豚鼠的动物模型构建方法及其应用，属于动物模型构建技术领域。本发明制备得到的牛支原体感染豚鼠动物模型，其对牛支原体敏感期长达42天，同时有效模拟牛支原体感染犊牛肺炎症状，因而可用于牛支原体疫苗保护效果尤其是长期保护效果的评价，具有良好的实际应用之价值。
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公开(公告)号：CN110317749B
公开(公告)日：2021-01-22
申请号：CN201910533099.4
申请日：2019-06-19
申请人： 山东省农业科学院奶牛研究中心
摘要： 本发明提供牛支原体强毒株及其应用，属于微生物技术领域。本发明牛支原体强毒株，分类命名为牛支原体(Mycoplasma bovis)16M株，中国典型培养物保藏中心(China Center for Type Culture Collection，CCTCC)保藏号为M2019235。该毒株能够诱导包括气喘、明显肺部实变等多种牛支原体感染典型临床病症，对牛的肺部具有很强的侵袭力，其活菌滴度高，毒力强，致病性高，病牛排菌时间长，发病快，攻毒后肺部毒株再次分离率高，可用于建立具有典型病症的牛支原体发病模型，符合牛场临床发病特征，因此本发明牛支原体强毒株具有良好的实际应用之价值。
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公开(公告)号：CN110483626A
公开(公告)日：2019-11-22
申请号：CN201910785036.8
申请日：2019-08-23
申请人： 山东省农业科学院奶牛研究中心
摘要： 本公开属于牛支原体疫苗技术领域，具体涉及一种牛支原体膜蛋白p59作为牛支原体抗原蛋白的应用。牛支原体是一种威胁牛场将抗养殖的重要病原，尚缺乏行之有效的商品化疫苗。本公开通过研究发现牛支原体表面膜蛋白p59具有抗原性，其抗体对牛支原体生长具有抑制作用，还能够降低牛支原体对MDBK细胞的抑制作用。另外，该膜蛋白与牛阳性血清抗体具有特异性结合作用，可用于牛支原体定位及检测。本公开通过基因工程表达纯化该膜蛋白p59得到相应的重组蛋白p59，提供了一种可工业化生产获得该蛋白的方法，其制备的重组蛋白p59可作为疫苗进行推广。
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公开(公告)号：CN110317749A
公开(公告)日：2019-10-11
申请号：CN201910533099.4
申请日：2019-06-19
申请人： 山东省农业科学院奶牛研究中心
摘要： 本发明提供牛支原体强毒株及其应用，属于微生物技术领域。本发明牛支原体强毒株，分类命名为牛支原体(Mycoplasma bovis)16M株，中国典型培养物保藏中心(China Center for Type Culture Collection，CCTCC)保藏号为M2019235。该毒株能够诱导包括气喘、明显肺部实变等多种牛支原体感染典型临床病症，对牛的肺部具有很强的侵袭力，其活菌滴度高，毒力强，致病性高，病牛排菌时间长，发病快，攻毒后肺部毒株再次分离率高，可用于建立具有典型病症的牛支原体发病模型，符合牛场临床发病特征，因此本发明牛支原体强毒株具有良好的实际应用之价值。
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