本发明目的在于提供一种基于寡核苷酸双亲性温敏性嵌段聚合物双功能荧光探针的制备方法，及用于环境中Hg2+离子和半胱氨酸(Cys)双功能检测的应用。步骤为：先制备得到HBMA单体，然后与聚乙二醇单甲醚的大分子链转移剂、N‑异丙基丙烯酰胺反应，合成了分布宽度指数窄、分子量可控、合适的低临界相转变温度的温敏嵌段聚合物，最后与荧光基团标记的核酸适配体(P1)结合形成荧光探针。本发明涉及的基于寡核苷酸双亲性温敏性嵌段聚合物荧光探针在特异性检测Hg2+离子后可与半胱氨酸(Cys)特异性结合达到双功能检测的目的。具有良好的选择性及灵敏性、便于操作、检测条件温和、聚合物易于回收利用等特点。