本发明涉及干细胞技术领域，具体涉及高质量多能干细胞的培养基、培养方法及其应用。本发明提供一种新的干细胞培养基(简称AIC培养基)，其为在基础培养基的基础上添加重组人活化素A、IWP2和CHIR99021。该培养基具有成分明确，无血清、无异源动物成分的优势。该培养基支持人多能干细胞通过单细胞传代在Feeder或Matrigel上进行稳定的贴壁培养，以及在低吸附材料上进行高效的悬浮扩增。与其他培养基相比，该培养基培养的人多能干细胞具有更高的单细胞存活率和建系效率，更快的增殖速度、更少的自发分化、更好的均质性和稳定性。AIC培养基具有现有培养体系无法比拟的优势，拥有广阔的应用前景和较高的商业价值。