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发明公开
CN110892066A 转化细菌细胞的方法 审中-实审

  • 专利标题： 转化细菌细胞的方法
  • 申请号： CN201880047705.5
    申请日： 2018-07-11
  • 公开(公告)号： CN110892066A
    公开(公告)日： 2020-03-17
  • 发明人: M·F·菲勒 , S·西梅尔
  • 申请人： 巴斯夫欧洲公司
  • 申请人地址： 德国莱茵河畔路德维希港
  • 专利权人： 巴斯夫欧洲公司
  • 当前专利权人： 巴斯夫欧洲公司
  • 当前专利权人地址： 德国莱茵河畔路德维希港
  • 代理机构： 北京市中咨律师事务所
  • 代理商 胡志君; 黄革生
  • 优先权： 17182610.0 2017.07.21 EP
  • 国际申请： PCT/EP2018/068846 2018.07.11
  • 国际公布： WO2019/016051 EN 2019.01.24
  • 进入国家日期： 2020-01-17
  • 主分类号： C12N9/10
  • IPC分类号： C12N9/10
转化细菌细胞的方法
摘要：
本发明涉及在重组宿主细胞中产生DNA甲基转移酶，其中所述DNA甲基转移酶使DNA甲基化，产生在识别序列GCNGC中含有5-甲基胞嘧啶的DNA，并且其中所述DNA甲基转移酶包含根据SEQ ID NO：33的编号在氨基酸残基(72)和氨基酸残基(106)之间的少于(35个)氨基酸残基。另外，本发明涉及这种DNA甲基转移酶用来产生细菌转化体的用途，所述用途包括步骤：(a)向第一细菌宿主细胞中引入多核苷酸，所述多核苷酸包含编码该DNA甲基转移酶的多核苷酸序列，以产生甲基化DNA，和(b)将甲基化DNA从第一细菌宿主细胞转移入第二细菌宿主细胞，其中第二细菌宿主细胞包含能够降解该DNA但不能降解该甲基化DNA的限制性核酸内切酶。
摘要（英）：

The present invention is directed to a producing a DNA methyltransferase in a recombinant host cell, wherein the DNA methyltransferase methylates DNA resulting in a DNA containing 5-methylcytosine within the recognition sequence GCNGC and wherein the DNA methyltransferase comprises less than (35) amino acid residues between amino acid residue (72) and amino acid residue (106) according to the numbering of SEQ ID NO: 33. Furthermore, the present invention is directed to the use of such DNA methyltransferase for the production of bacterial transformants comprising the steps of (a) introducing into a first bacterial host cell a polynucleotide comprising a polynucleotide sequence encoding the DNA methyltransferase to produce a methylated DNA and (b) transferring the methylated DNA from the first bacterial host cell into a second bacterial host cell, wherein the second bacterial host cell comprises a restriction endonuclease able to degrade the DNA but unable to degrade the methylated DNA.

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