本发明提供了一种快速高效的猪肺炎支原体增菌培养基以及制备方法，属于兽医生物学技术范畴。培养基包括I、II和III共3部分；其主要成分包括DMEM、水解乳蛋白、HEPES、酵母提取物、PPLO、BHI、精氨酸、谷氨酰胺、丙酮酸钠、DNA以及酸化猪血清等；该发明培养基在培养猪肺炎支原体时快速高效并且稳定，在实验室将猪肺炎支原体种子液按1∶13接种至该培养基100ml体系内，在40-48小时内可使猪肺炎支原体的CCU达到1011/ml；其培养基不仅提高了猪肺炎支原体的培养滴度，更是提高了猪肺炎支原体的生长速率，采用该培养基生产疫苗用抗原时，提高了生产效益并且降低了生产成本，经济效益显著。