本发明公开了一种检测牛奶中黄曲霉毒素M1的时间分辨免疫定量试纸条，属于时间分辨免疫分析快速检测技术领域。本发明利用竞争免疫法，通过读取荧光定量免疫分析仪上T线的荧光值，即时定量检测分析牛奶样品中的黄曲霉毒素M1。本发明还提供了一种应用上述试纸条检测乳及乳制品等样品前处理的方法，以期降低基质效应。本发明试纸条检测黄曲霉毒素毒素M1的方法简单快速，稳定可靠且灵敏度高，适合大量样本的的筛查和现场监控，具有良好的商业化应用前景。