本发明公开一种抗组蛋白抗体测定试剂，包括包被有组蛋白抗原的固相载体，其中，所述组蛋白抗原为经还原处理的天然组蛋白；进一步的，所述组蛋白抗原为经还原处理的天然组蛋白和重组组蛋白H1亚基组成；公开的试剂盒中，还可以包括第三试剂；通过调整第三试剂的渗透压可进一步调整抗原抗体反应的整体环境渗透压。本发明的试剂、试剂盒及使用方法能明显降低漏检率、且特异性好、灵敏度高、重复性好、稳定性好，且配套全自动免疫分析仪，能实现仪器自动化检测等优点。