本发明公开了口含烟中菌落总数的检测方法，称取口含烟样品，加人到D/E中和肉汤培养基中，混匀制得样液；加入制备好的菌液1mL，均质1min，获得1：10样品匀液；将上述样品匀液稀释成1：100的样品匀液；按上述操作，依次制成十倍递增系列的稀释样品匀液；选取2～3个适宜的连续稀释度的样品匀液，每个平皿1mL，两组平行，并做空白对照；将琼脂倾注于每个平皿，并转动平皿使其混合均匀；待琼脂凝固后，将平皿翻转，在培养箱中培养T1时间；培养完成后记录稀释倍数和菌落数量。本发明通过稀释作用使菌落总数的回收率有明显提高，降低了口含烟对菌落总数生长的抑制作用，较为真实的检测出口含烟的菌落总数，为口含烟的质量提供参考依据。