本发明属于医药生物技术领域，具体公开了一种用于食管鳞癌早期诊断的ELISA试剂盒，该试剂盒包括固相载体和包被于固相载体上的肿瘤相关抗原，所述肿瘤相关抗原由HMGB1、TLR4、TAK1、ATG5、SLC22A3和CD38组成。进一步地，所述试剂盒还包括样品稀释液、第二抗体、第二抗体稀释液、阳性对照血清、阴性对照血清、显色液、终止液和洗涤液。本发明的ELISA试剂盒可以有效检测食管鳞癌，尤其是早期食管鳞癌，其检测灵敏度高达92.7%，特异度高达84.0%，可用于食管鳞癌高发区无症状人群的大规模筛查、诊断，有利于无症状高危人群筛查和早期发现。