组成型表达猪胃蛋白酶原C的毕赤酵母工程菌及其应用
摘要:
本发明公开了一种组成型表达猪胃蛋白酶原C(PGC)的毕赤酵母工程菌株。本发明将经人工改造的猪胃蛋白酶原C(PGC)基因连接到毕赤酵母组成型表达载体pGAPZαA,并导入毕赤酵母菌株中,经筛选鉴定得到不需甲醇诱导即可高效组成型分泌表达猪胃蛋白酶原C的毕赤酵母工程菌株。该工程菌株在培养基YPD中分泌表达猪胃蛋白酶原C,连续培养48h后酶活为180U﹒mL-1,实现了猪胃蛋白酶原C在毕赤酵母中的组成型高表达,后期再经过培养基及培养条件优化可实现猪胃蛋白酶原C的高效连续生产。本发明的猪胃蛋白酶原C可在pH 5.4以下的酸性条件下自动激活生成有活性的胃蛋白酶,可广泛应用于饲料、食品和医药等行业,具有良好的商业应用前景。
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