本发明包括用于制备和分离N-乙酰基半胱氨酸酰胺、其中间体和衍生物的方法，该方法包括：使胱氨酸与醇和氯化试剂接触以形成含有L-胱氨酸二甲酯二盐酸盐的有机溶液；将干燥或未干燥的L-胱氨酸二甲酯二盐酸盐与三乙胺、乙酸酐和乙腈合并以形成二-N-乙酰基胱氨酸二甲酯；将干燥的二-N-乙酰基胱氨酸二甲酯与氢氧化铵混合以形成二-N-乙酰基胱氨酸酰胺；和使用二硫苏糖醇、三乙胺和醇将干燥的二-N-乙酰基胱氨酸二甲酯分离为N-乙酰基半胱氨酸酰胺。