本发明公开了一种甲砜霉素半抗原、抗原及其化学发光免疫检测试剂盒与应用。本发明公开一种甲砜霉素半抗原，同时也公开相应的人工抗原和化学发光酶联免疫检测试剂盒及其应用。本发明提供的甲砜霉素半抗原与载体蛋白偶联可得到甲砜霉素抗原。所述甲砜霉素抗原可应用于制备甲砜霉素特异性抗体。在抗体制备基础上建立了甲砜霉素化学发光酶联免疫检测方法，线性检测范围为0.1～8.1μg/L，灵敏度为0.26μg/L，检出限为0.1μg/L，添加回收率为105.41～125.93％，灵敏度高、稳定性好，为动物组织样品中甲砜霉素的残留检测提供一种更方便、快捷和简单的方法。