本发明公开了核桃分心木中酚酸葡萄糖苷类化合物的分离方法及应用，属于食品技术领域。所述方法包括以下步骤：(1)提取：核桃分心木经粉碎后，采用乙醇提取得到核桃醇提物；(2)分离：将步骤(1)得到的核桃醇提物进行柱层析，并依次采用不同浓度乙醇依次洗脱，反复净化洗脱，分离得到酚酸葡萄糖苷类化合物；所述酚酸葡萄糖苷类化合物为2-羟基-5-甲氧基苯基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷，6-羟基萘基-1,2-(2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷)和2,6-二羟基萘基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。通过药理实验证实这三种化合物具有良好的抗氧化活性。