本发明公开了一种检测肺癌循环肿瘤细胞的方法，采集肺小结节患者外周血，加入红细胞裂解液合并离心的方法去除红细胞，再用连接磁珠的CD45抗体磁性分离去除白细胞。剩余的循环细胞经洗涤、沉淀，进行涂片。用CEP8荧光探针、EpCAM抗体和Pan-CK抗体进行染色，并在激光共聚焦显微镜下进行扫描。采集信号，并进行读片，判定并计数CTCs。本发明的显著优点为所需标本量少，与单一marker检测法相比较，对CTCs的检出量多，检出率更高，检测效果好。