本发明属于钆贝葡胺注射液相关杂质的制备技术领域，具体涉及一种[[N‑N’‑[2‑(二羧甲基氨基)乙基]‑N’‑(羧甲基)氨基乙基]甘氨酸根(4‑)]钆(1‑)]单葡甲胺的制备方法，反应式如下所示：本发明首次提供了钆贝葡胺注射液相关杂质[[N‑N’‑[2‑(二羧甲基氨基)乙基]‑N’‑(羧甲基)氨基乙基]甘氨酸根(4‑)]钆(1‑)]单葡甲胺的制备方法；制备的化合物纯度及含量较高，标定后可以作为钆贝葡胺注射液相关杂质的对照品。