本发明属于免疫检测领域，具体涉及一种通过肿瘤标志物蛋白联合检测恶性肿瘤的诊断试剂盒，所述诊断试剂盒通过化学发光发联合检测癌胚抗原CEA、糖类抗原CA125和C-反应蛋白CRP，从而进行恶性肿瘤的诊断和筛查，与现有技术相比，本发明的有益效果：本发明通过采用化学放光方法，在一个检测卡上联合检测癌胚抗原CEA、糖类抗原CA125和C-反应蛋白CRP，通过检测血清中三种蛋白的浓度，来诊断恶性肿瘤，提高了特异性，并降低了成本和检测时间；此外，本发明采用单人份，高度集成的设计，极大的减小了检测卡体积，有利于化学发光仪器的小型化和便携化，使本发明适用于各种场景的应用。