本发明公开了一种密集纤维细胞的轮廓估算方法，其包括以下步骤：S1、获取密集纤维细胞图像；S2、对密集纤维细胞图像进行Frangi滤波，并通过阈值分割获取细胞部分边界线和细胞质部分区域，得到具有部分轮廓的图像；S3、通过最短距离搜索方法获取具有部分轮廓的图像中的轮廓控制点；S4、对于同一细胞的边界线上的轮廓控制点，保留端点并预设轮廓控制点步长m，每隔m个轮廓控制点选取一个轮廓控制点，得到拟合点集；S5、基于拟合点集采用B样条逼近曲线算法进行曲线拟合，将拟合的封闭曲线作为细胞轮廓，完成密集纤维细胞的轮廓估算。本发明解决了现有算法难以获取密集纤维细胞轮廓的问题。