本发明公开了一种高效转化维生素D3为其活性形式的菌株及其应用，本发明属生物技术领域，涉及一株高效转化维生素D3的巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)H‑1及其应用，该菌株保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.20362。巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)H‑1能转化维生素D3为25‑OH‑VD3和1α,25‑diOH‑VD3，在底物投料量为1.0g/L的条件下，底物转化率达95％，25‑OH‑VD3浓度达26mg/L，摩尔得率4.90％；1α,25‑diOH‑VD3浓度达23mg/L，摩尔得率4.25％。