本发明属于发酵液的后提取，特别是指产葡萄糖氧化酶毕赤酵母发酵液的固液分离方法。包括按照公开号为CN107937360A的文献中公开的方法制备产葡萄糖氧化酶毕赤酵母发酵液并调节发酵液pH值；将壳聚糖溶于醋酸溶液制成壳聚糖溶液，在上述壳聚糖溶液中加入无水乙醇，制成混合液；在常温条件下将混合液与调节pH后的发酵液混合均匀并搅拌后静置；将制成的物料高速离心去除菌体，获得含有葡萄糖氧化酶的上清液。本发明有效解决了现有技术中存在的菌体去除效果差，酶活回收率低等问题，具有菌体去除效果好、酶活回收率高、所制备的葡萄糖氧化酶稳定性好等优点。