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公开(公告)号:CN114107364B
公开(公告)日:2023-07-28
申请号:CN202111579365.0
申请日:2021-12-22
申请人: 河北省微生物研究所有限公司
摘要: 本发明公开了一种产漆酶重组毕赤酵母工程菌株的构建方法,涉及生物工程技术领域,包括以下步骤:S1:将漆酶基因连接到质粒载体上,得重组质粒pPIC9K‑Laccase;S2:将重组质粒pPIC9K‑Laccase转入毕赤酵母X33感受态细胞中,培养,得阳性转化子X33/pPIC9K‑Laccase感受态细胞;S3:将阳性转化子X33/pPIC9K‑Laccase感受态细胞与分子伴侣Hac1融合,培养,对所得菌株漆酶的活力进行筛选,得产漆酶重组毕赤酵母工程菌株。该方法构建的工程菌株漆酶活力高,稳定性好。
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公开(公告)号:CN114107364A
公开(公告)日:2022-03-01
申请号:CN202111579365.0
申请日:2021-12-22
申请人: 河北省微生物研究所有限公司
摘要: 本发明公开了一种产漆酶重组毕赤酵母工程菌株的构建方法,涉及生物工程技术领域,包括以下步骤:S1:将漆酶基因连接到质粒载体上,得重组质粒pPIC9K‑Laccase;S2:将重组质粒pPIC9K‑Laccase转入毕赤酵母X33感受态细胞中,培养,得阳性转化子X33/pPIC9K‑Laccase感受态细胞;S3:将阳性转化子X33/pPIC9K‑Laccase感受态细胞与分子伴侣Hac1融合,培养,对所得菌株漆酶的活力进行筛选,得产漆酶重组毕赤酵母工程菌株。该方法构建的工程菌株漆酶活力高,稳定性好。
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公开(公告)号:CN112375749A
公开(公告)日:2021-02-19
申请号:CN202011283747.4
申请日:2020-11-17
申请人: 河北省微生物研究所
摘要: 本发明属于发酵液的后提取,特别是指产葡萄糖氧化酶毕赤酵母发酵液的固液分离方法。包括按照公开号为CN107937360A的文献中公开的方法制备产葡萄糖氧化酶毕赤酵母发酵液并调节发酵液pH值;将壳聚糖溶于醋酸溶液制成壳聚糖溶液,在上述壳聚糖溶液中加入无水乙醇,制成混合液;在常温条件下将混合液与调节pH后的发酵液混合均匀并搅拌后静置;将制成的物料高速离心去除菌体,获得含有葡萄糖氧化酶的上清液。本发明有效解决了现有技术中存在的菌体去除效果差,酶活回收率低等问题,具有菌体去除效果好、酶活回收率高、所制备的葡萄糖氧化酶稳定性好等优点。
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公开(公告)号:CN110628790A
公开(公告)日:2019-12-31
申请号:CN201911033580.3
申请日:2019-10-28
申请人: 河北省微生物研究所
摘要: 本发明属于新基因的制备及工程菌的构建,特别是指一种利用分子伴侣构建的吡喃糖氧化酶基因、蛋白、毕赤酵母菌及制备和应用。本发明是将毕赤酵母中EroⅠ、PDI、CNE1、SEC53等基因分别克隆连接到毕赤酵母表达载体pPICZ等系列衍生质粒连接,并与P2O共表达转化入Pichia pastoris GS115菌株中,涂布于不同博来霉素浓度梯度YPD平板上考察其效果,通过分子伴侣共表达和发酵条件优化,经筛选鉴定得到一株较原有菌株增强分泌表达吡喃糖氧化酶的菌株,该菌株表达的吡喃糖氧化酶在10L发酵罐上酶活达405U/mL,比没有分子伴侣共表达菌株酶活提高1倍,为吡喃糖氧化酶规模化生产奠定了良好基础。
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公开(公告)号:CN103964928B
公开(公告)日:2015-11-18
申请号:CN201410210911.7
申请日:2014-05-19
申请人: 河北省微生物研究所
IPC分类号: C05G1/00
摘要: 本发明属于微生物土壤修复剂的制备,特别是指一种微生物土壤修复剂的制备方法。包括将地衣芽孢杆菌CGMCC1.7461经扩大培养制成种子液,在含有碳源、氮源和生长因子的无菌发酵培养基内通气培养种子液,获得具有有机磷农药降解能力的地衣芽孢杆菌发酵液;将地衣芽孢杆菌发酵液:液态微生物钾磷复合肥∶黄腐酸钾浓缩液按比例混配后制成微生物土壤修复剂。本发明解决了现有技术存在的有机磷农药大面积使用造成的环境污染问题,具有对土壤中有机磷农药的降解效果显著、有效地改良了土壤肥力结构和食品的安全性,且产品的产量和质量均有不同程度的提高等优点。
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公开(公告)号:CN112481227B
公开(公告)日:2022-10-28
申请号:CN202011417612.2
申请日:2020-12-05
申请人: 河北省微生物研究所有限公司
摘要: 本发明涉及一种发酵制备葡萄糖脱氢酶的方法,特别是指一种利用维生素B2提高FAD依赖的葡萄糖脱氢酶产量的方法。是将保藏编号为CGMCC NO.14382的巴斯德毕赤酵母Pichia pastoris接种至以甘油为碳源的发酵培养液中进行培养;包括菌株培养阶段、碳源饲喂阶段、饥饿饲喂阶段、诱导表达阶段在诱导过程加维生素B2水溶液。本发明有效解决了现有技术中生产制备的葡萄糖脱氢酶酶活较低的问题,具有同体积发酵液获得更高的葡萄糖脱氢酶产量等优点。
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公开(公告)号:CN110699346A
公开(公告)日:2020-01-17
申请号:CN201911103871.5
申请日:2019-11-13
申请人: 河北省微生物研究所
摘要: 本发明属于酶制剂的制备,特别是指葡萄糖氧化酶冻干粉的制备方法。按照公开号CN107937360A中的方法制备含有葡萄糖氧化酶的发酵液;将含有葡萄糖氧化酶的发酵液高速离心去除发酵液中的菌体,将离心后上清液用无水乙醇纯化后用磷酸盐缓冲液稀释至所需酶活;加入PEG2000作为冻干保护剂使其充分溶解并在酶液中分布均匀;预冻后置于真空冷冻干燥剂内冷冻干燥得到淡黄色葡萄糖氧化酶冻干粉。本发明解决了目前葡萄糖氧化酶直接进行冷冻干燥导致的酶活回收率低的问题,具有葡萄糖氧化酶冻干粉酶活回收率高、易于保存和运输、为葡萄糖氧化酶应用于生物医药、饲料及食品加工等领域提供了便利等优点。
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公开(公告)号:CN103947682B
公开(公告)日:2017-01-04
申请号:CN201410209865.9
申请日:2014-05-19
申请人: 河北省微生物研究所
摘要: 本发明属于微生物菌剂的制作,特别是指地衣芽孢杆菌菌剂在抗草莓重茬中的应用。该菌剂的生产工艺是将地衣芽孢杆菌ACCC01957接种于含有碳源及氮源的发酵培养基进行通气发酵制成发酵液,发酵液经絮凝、添加保护剂,载体吸附,喷雾干燥喷干制成菌粉。本发明解决了现有技术存在的肥力降低,有毒物质积累,严重影响草莓的品质和产量问题,具有抗草莓重茬用地衣芽孢杆菌菌剂的各项技术指标符合GB20287-2006的要求,保质期达18个月以上,比采用氯化苦熏蒸的大棚中的草莓在产量、糖酸比、可溶性固形物含量、Vc含量等技术指标上具备明显优势,能很好的降低发病率,增强作物抗性,提高草莓产量等优点。
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公开(公告)号:CN103642873B
公开(公告)日:2015-09-09
申请号:CN201310651488.X
申请日:2013-12-05
申请人: 河北省微生物研究所
摘要: 本发明属于微生物多糖的制备,特别是指一种采用胶质类芽孢杆菌生产微生物絮凝剂的方法。采用热冲击方法对胶质类芽孢杆菌ACCC10013进行菌种驯化,在含有碳源、氮源和生长因子的无菌发酵培养基内通气培养步骤A中驯化后的胶质类芽孢杆菌ACCC10013,获得含有微生物絮凝剂的发酵液,采用大孔吸附树脂对步骤B中制备的含有微生物絮凝剂的发酵液进行分离,制成微生物絮凝剂。本发明解决了现有技术存在的成本高、絮凝剂的纯度低等问题,具有制备过程工艺成本低、收率高、产品纯度及活性高等优点。
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公开(公告)号:CN103555692A
公开(公告)日:2014-02-05
申请号:CN201310519860.1
申请日:2013-10-29
申请人: 河北省微生物研究所
CPC分类号: C12N9/2468 , C12Y302/01108
摘要: 本发明属于微生物发酵,特别是指一种采用固体罐发酵制备米曲霉乳糖酶发酵曲的方法。包括孢子悬液的制备、固体罐发酵、曲盘培养等工艺步骤,本发明解决了现有技术存在的发酵周期长、染菌率高等技术问题,具有发酵周期短、染菌率低、生产效率高等优点。
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