本发明属于生物工程技术领域。本发明涉及一种重组蛋白，该重组蛋白包含犬Ⅱ型腺病毒蛋白的两个优势抗原表位，为提高该重组蛋白在原核表达系统中的产量，采用大肠杆菌偏爱密码子将该重组蛋白氨基酸序列转换为对应的核苷酸序列，化学合成该核苷酸序列并构建重组表达载体。本发明还涉及用该重组蛋白免疫小鼠建立噬菌体库，经淘选筛选得到对应犬Ⅱ型腺病毒蛋白单链抗体scfv序列，将得到的scfv序列构建成完整鼠IgG1抗体序列表达载体，通过瞬转HEK293F细胞表达单克隆抗体，纯化单克隆抗体并分别标记铕离子（Eu3+），通过正交实验确定最佳单抗配对组合，可用于犬传染性喉气管炎和肺炎的早期诊断。