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公开(公告)号:CN117700539A
公开(公告)日:2024-03-15
申请号:CN202311729508.0
申请日:2023-12-15
申请人: 杭州贤至生物科技有限公司
摘要: 本发明属于生物工程技术领域。本发明提供了一种重组蛋白,该重组蛋白氨基酸序列由犬瘟热病毒H蛋白的两个优势抗原表位串联组成,采用大肠杆菌偏爱密码子将该重组蛋白氨基酸序列转换为对应的核苷酸序列,化学合成该核苷酸序列并构建重组表达载体,从而提高该重组蛋白在大肠杆菌中的表达量。本发明还涉及用该重组蛋白免疫小鼠,通过流式细胞仪分选出与重组蛋白特异性结合的B淋巴细胞,利用单细胞PCR扩增B淋巴细胞抗体重链及轻链可变区序列,将得到的序列构建完整鼠IgG抗体序列重组表达载体,通过瞬转HEK293F细胞表达单克隆抗体,纯化单克隆抗体并分别标记胶体金颗粒,通过正交实验确定最佳单抗配对组合,对犬瘟热病毒的早期诊断和防治有重要意义。
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公开(公告)号:CN117700538A
公开(公告)日:2024-03-15
申请号:CN202311729504.2
申请日:2023-12-15
申请人: 杭州贤至生物科技有限公司
摘要: 本发明属于生物工程技术领域。本发明涉及一种重组蛋白,该重组蛋白包含狂犬病毒N蛋白的两个优势抗原表位,为提高该重组蛋白在原核表达系统中的产量,采用大肠杆菌偏爱密码子将该重组蛋白氨基酸序列转换为对应的核苷酸序列,化学合成该核苷酸序列并构建重组表达载体。本发明还涉及用该重组蛋白免疫小鼠建立噬菌体库,经淘选筛选得到对应抗狂犬病毒N蛋白单链抗体scfv序列,将得到的scfv序列构建成完整鼠IgG1抗体序列表达载体,通过瞬转HEK293F细胞表达单克隆抗体,纯化单克隆抗体并分别标记铕离子(Eu3+),通过正交实验确定最佳单抗配对组合,可用于检测狂犬病毒N蛋白抗原。
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公开(公告)号:CN114195899B
公开(公告)日:2023-07-18
申请号:CN202111589084.3
申请日:2021-12-23
申请人: 杭州贤至生物科技有限公司
摘要: 抗可卡因特异性抗体、质粒载体及方法。本发明用COC‑BSA偶联物免疫小鼠,分离鼠脾脏淋巴细胞并通过流式细胞仪分选出特异性B淋巴细胞,利用单细胞PCR扩增B淋巴细胞抗体重链及轻链可变区序列,将得到的序列构建完整鼠IgG抗体序列重组表达载体,并瞬转HEK293F细胞,纯化单克隆抗体后,通过胶体金层析实验筛选出优势单抗。该方法制备的单克隆抗体与用传统方法制备单克隆抗体相比,优点在于大大缩短了时间,并且得到的单克隆抗体稳定性高,均一性好,大大减小了批间差异。
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公开(公告)号:CN114213543B
公开(公告)日:2023-07-14
申请号:CN202111632968.2
申请日:2021-12-29
申请人: 杭州贤至生物科技有限公司
摘要: 本发明抗犬胰脂肪酶特异性单链抗体、质粒载体及方法,提供了一种重组蛋白,该重组蛋白氨基酸序列由犬胰脂肪酶的两个优势表位重复串联组成,并采用大肠杆菌偏爱密码子将重组蛋白氨基酸序列转换为对应的核苷酸序列,化学合成核苷酸序列并构建重组表达载体,从而提高重组蛋白在大肠杆菌中的表达量。本发明还涉及用该重组蛋白免疫小鼠建立噬菌体库,经淘选筛选得到对应cPL单链抗体scfv序列,将得到的scfv序列构建成完整鼠IgG抗体序列表达载体,通过瞬转HEK293F细胞表达单克隆抗体,纯化单克隆抗体,通过免疫荧光正交实验确定最佳单抗配对组合。
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公开(公告)号:CN116041505A
公开(公告)日:2023-05-02
申请号:CN202211677472.1
申请日:2022-12-26
申请人: 杭州贤至生物科技有限公司
摘要: 本发明属于生物技术领域。本发明提供了一种重组蛋白,该重组蛋白氨基酸序列由肌钙蛋白I(Cardiac Troponin I,cTnI)两个优势表位重复串联组成,并采用大肠杆菌偏爱密码子将重组蛋白氨基酸序列转换为对应的核苷酸序列,化学合成核苷酸序列并构建重组表达载体,从而提高重组蛋白在大肠杆菌中的表达量。本发明还涉及用该重组蛋白免疫小鼠建立噬菌体库,经淘选筛选得到对应肌钙蛋白I单链抗体scfv序列,将得到的scfv序列构建成完整鼠IgG1抗体序列表达载体,通过瞬转HEK293F细胞表达单克隆抗体,纯化单克隆抗体,通过免疫荧光正交实验确定最佳单抗配对组合。
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公开(公告)号:CN116041497A
公开(公告)日:2023-05-02
申请号:CN202211657359.7
申请日:2022-12-22
申请人: 杭州贤至生物科技有限公司
摘要: 本发明属于生物工程技术领域。本发明涉及一种重组蛋白,该重组蛋白包含猫杯状病毒(FCV)(Feline calicivirus,FCV)蛋白的两个优势抗原表位,为提高该重组蛋白在原核表达系统中的产量,采用大肠杆菌偏爱密码子将该重组蛋白氨基酸序列转换为对应的核苷酸序列,化学合成该核苷酸序列并构建重组表达载体。本发明还涉及用该重组蛋白免疫小鼠建立噬菌体库,经淘选筛选得到对应猫杯状病毒(FCV)蛋白单链抗体scfv序列,将得到的scfv序列构建成完整鼠IgG1抗体序列表达载体,通过瞬转HEK293F细胞表达单克隆抗体,纯化单克隆抗体并分别标记铕离子(Eu3+),通过正交实验确定最佳单抗配对组合,可用于猫上呼吸道感染的早期诊断。
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公开(公告)号:CN114292334A
公开(公告)日:2022-04-08
申请号:CN202111594778.6
申请日:2021-12-24
申请人: 杭州贤至生物科技有限公司
IPC分类号: C07K16/44 , G01N33/543 , G01N33/577
摘要: 本发明公开了一种抗可替宁特异性抗体、质粒载体及方法,包括由COT‑KLH偶联物免疫小鼠,分离鼠脾脏淋巴细胞并通过流式细胞仪分选出与该蛋白特异性结合的B淋巴细胞,利用单细胞PCR将B淋巴细胞中的抗体重链及轻链可变区序列扩增出来,将得到的序列构建成完整鼠IgG抗体序列表达载体,通过瞬转HEK293F细胞表达单克隆抗体,纯化单克隆抗体并分别标记胶体金颗粒,通过胶体金竞争法确定优势单抗,对评估受检者环境烟草烟雾暴露程度、吸烟量以及吸烟对人体健康影响程度有重要意义。
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公开(公告)号:CN112521461A
公开(公告)日:2021-03-19
申请号:CN202011495681.5
申请日:2020-12-17
申请人: 杭州贤至生物科技有限公司
IPC分类号: C07K14/10 , C12N15/41 , C12N15/85 , C12N5/10 , G01N33/569
摘要: 本发明涉及生物技术领域,公开了一种甲型肝炎病毒重组蛋白的制备及其快速检测方法。本发明挑选了甲型肝炎病毒抗原两段优势表位,通过一段柔性片段(四个甘氨酸)作为连接短肽序列,将两段优势表位经重复串联后,组成一个重组蛋白。并采用CHO细胞偏爱密码子将该重组抗原氨基酸序列转换为对应的核苷酸序列,化学合成该核苷酸序列并构建重组表达载体,从而提高该重组抗原在CHO细胞中的表达量。另外,采用并基于该重组蛋白建立了高特异性和高灵敏度的胶体金诊断平台。
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公开(公告)号:CN109517072A
公开(公告)日:2019-03-26
申请号:CN201811384880.1
申请日:2018-11-20
申请人: 杭州贤至生物科技有限公司
摘要: 本发明涉及生物技术领域,公开了一种伤寒杆菌重组蛋白及其单克隆抗体的制备。本发明所述伤寒杆菌重组蛋白,其氨基酸序列如SEQ ID No:1所示。为增强该重组蛋白在原核细胞中的表达效果,本发明运用一段柔性片段(四个甘氨酸)作为连接短肽,将伤寒杆菌鞭毛(H)抗原的A优势表位和B优势表位序列串联后三次重复,组成一个重组蛋白。本发明还涉及该重组蛋白单克隆抗体的制备,经过免疫、细胞融合及多轮筛选得到单克隆细胞株,纯化单克隆抗体并分别标记荧光微球,正交实验确定最佳单抗配对组合。用该重组抗原免疫制得的单克隆抗体具有高特异性,可用于伤寒杆菌感染的早期诊断。
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公开(公告)号:CN118027192A
公开(公告)日:2024-05-14
申请号:CN202410207592.8
申请日:2024-02-26
申请人: 杭州贤至生物科技有限公司
摘要: 本发明公开了一种抗猫SAA特异性单链抗体、质粒载体及方法,本发明属于生物工程技术领域。本发明涉及一种重组蛋白,该重组蛋白包含猫血清淀粉样蛋白A(猫SAA)的两个优势抗原表位,为提高该重组蛋白在原核表达系统中的产量,采用大肠杆菌偏爱密码子将该重组蛋白氨基酸序列转换为对应的核苷酸序列,化学合成该核苷酸序列并构建重组表达载体。本发明还涉及该重组蛋白免疫小鼠建立噬菌体库,经淘选筛选得到对应猫SAA单链抗体scfv序列,将得到的scfv序列构建成完整鼠IgG1抗体序列表达载体,通过瞬转HEK293F细胞表达单克隆抗体,同时也用该重组蛋白免疫兔子,纯化多克隆抗体。将纯化的多克隆抗体标记辣根过氧化物酶(HRP),ELISA正交实验确定最佳配对组合。
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