本发明公开了一种利用单烯醇酮醋酸酯制备药物布瑞诺龙的方法，以单烯醇酮醋酸酯为原料，经氢化‑水解、氧化、酶催化还原“四步反应三锅法”制备布瑞诺龙。本发明制备方法中，采用来自于天然产物的原料单烯醇酮醋酸酯，其5α‑构型单一，反应过程中酶催化还原3‑酮基的立体选择性高，制备方法中无需使用成本较高的化学试剂和催化剂，避免常见制备方法中产生许多废弃物、反应条件苛刻等的缺陷。本发明反应条件温和，操作简单方便，可以实现药物布瑞诺龙的高效、低成本制备。