本发明公开一种基于明亮发光杆菌快速检测玉米赤霉烯酮生物毒性的方法，涉及玉米赤霉烯酮生物毒性检测领域。该方法使用明亮发光杆菌冻干粉作为检验玉米赤霉烯酮生物毒性的受试生物。本方法中，在室温下，不同浓度玉米赤霉烯酮与明亮发光杆菌接触后，随着玉米赤霉烯酮浓度升高，明亮发光杆菌相对发光强度减弱。表明玉米赤霉烯酮浓度越高，对明亮发光杆菌发光抑制性越强，即玉米赤霉烯酮浓度越高对明亮发光杆菌的生物毒性作用越强。本发明的检测结果完全能够满足对玉米赤霉烯酮残留检测，该方法前处理简单、反应快、检测灵敏、操作简便、成本低，可对玉米赤霉烯酮生物毒性实现快速检测。因此，本发明提供的方法适于规模化工业生产及应用。