本发明涉及医用材料领域，公开了一种温度响应型Janus纳米纤维敷料的制备方法，包括：（1）温敏聚合物的制备；（2）温度响应型Janus纳米纤维敷料的制备：在棉织物上通过静电纺丝技术依次电纺含温敏聚合物的纺丝溶液、聚氨酯纺丝溶液，制备得到底层为亲水层棉、中间层为温敏纳米纤维、上层为疏水层聚氨酯纳米纤维的三层结构的Janus纳米纤维敷料；（3）交联处理：将Janus纳米纤维敷料通过热压交联，得到成品。本发明制备的Jnaus纳米纤维敷料具有温度响应性，可通过温敏层的润湿性转变，可逆切换Janus纳米纤维疏水部分的厚度，从而控制液体运输方向，实现智能化管理体液。