本发明提供了一种15N和14N穿插分布的均匀氮掺杂石墨烯及制备方法与应用。该制备方法，首先以便宜易得的15N标记的亚硝酸钠或亚硝酸钾为原料，通过高效率的重氮盐形成反应，与1,3,5‑三氨基苯进行三重偶联，实现15N选择性标记2,4,6‑位置的六氨基苯盐酸盐；再基于‑C＝O与‑NH2进行的高效温和的缩聚反应，实现15N和14穿插分布的均匀氮掺杂石墨烯的高效合成。因此，该方法具有操作简单、可行性强、经济高效等优点；同时，通过该方法，首次合成了15N和14N穿插分布的均匀氮掺杂石墨烯材料，且标记后的氮掺杂石墨烯材料凭借结构内部周期性均匀分布的15N原子，提供大量可供检测的信号，为后续研究多孔氮化石墨烯材料的化学结构和本征物理化学性能提供了良好的平台条件。