本发明公开了一种液态发酵规模化生产灵芝三萜的方法，该方法包括如下步骤：(1)灵芝菌丝体进行发酵，分为两个阶段：发酵第一阶段(0‑5d)：控制发酵罐通气比为0.8‑1.5vvm，温度为26℃，搅拌转速0‑100r/min；发酵第二阶段(5d‑发酵结束)：提高发酵罐通气比至2.0‑3.0vvm，温度为26℃，搅拌转速0‑100r/min，直至发酵液全部干涸，没有水分时收取固形物；即为所需的灵芝菌丝体固形物；(2)对发酵收取的固形物进行灵芝三萜提取并测定；其中灵芝三萜的提取采用乙醇提取方法。本发明所提供的灵芝三萜液态发酵控制工艺简便、高效，利用本发明的方法生产的灵芝菌丝体中灵芝三萜的产量明显提高。