本发明涉及磁性固定化酶领域，公开了一种以环氧基修饰的磁性壳聚糖纳米粒子为载体的固定化磷脂酶C的方法。采用环氧氯丙烷对共价法制备的磁性壳聚糖纳米粒子进行修饰，再对环氧基载体进行醛基活化，制取了一种具有醛基和氨基的磁性载体，在pH的改变下，利用多点共价结合的方式将磁性壳聚糖纳米载体与磷脂酶C结合，通过氨基与氨基之间的静电吸附和氨基与醛基之间的共价结合，将PLC的非活性中心基团与载体多点共价结合，生产出一种稳定性更好固定化PLC。本发明重点解决的问题不再是为了实现酶与底物的快速分离，更多的集中在优化酶的特性上，制备的固定化酶具有更高的活性和稳定性。之后在工业上的大规模生产提供了理论依据。