本发明公开了一种酵母β‑葡聚糖的提取方法及其含量测定方法，包括将样品加入乙醇溶液溶散均匀，采用苯酚硫酸溶液溶解提取；采用硫酸苯酚法测定样品中的总葡聚糖含量；再用淀粉酶解法测定样品中的非β‑葡聚糖含量；总葡聚糖含量与非β‑葡聚糖含量的差值即为样品中酵母β‑葡聚糖的含量。本发明的提取方法能使酵母β‑葡聚糖得到有效提取，含量测定结果能更能真实反映样品中酵母β‑葡聚糖含量。本发明通过方法学验证，证明该测定方法科学有效，能对酵母β‑葡聚糖原料中的酵母β‑葡聚糖含量起到质量控制的目的。